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PCR試劑盒注意事項及原則
2021-5-26
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PCR試劑盒注意事項:①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。⑦...
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心得體會:組織樣本的western blot,這十點需要注意
2021-4-28
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利用組織樣本來進行Westernblot,這是許多實驗室常常開展的工作。不過,若是想獲得重復可靠的印跡結果,也絕非易事。在此,Bio-Rad的專家貢獻了一些經驗,可以幫助您獲得清晰的圖像和可靠的數據。1.快速處理組織使用干凈的工具來收集和處理組織樣本。為了去除可能影響蛋白穩定性的污染物,用預冷的中性緩沖液簡單洗滌。洗滌后,在液氮中快速冷凍組織,以便保留蛋白的結構和特征,比如翻譯后修飾(PTM)。組織樣本可保存在冰上,立即勻漿處理。若保存在–20°C,蛋白仍然有可能降解,因此組...
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Elisa試劑盒競爭法測抗原的原理與步驟
2021-4-21
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Elisa試劑盒競爭法測抗原的原理與步驟當抗原材料中的干擾物質不易除去,或不易得到足夠的純化抗原時,可用此法檢測特異性抗體。其原理為標本中的抗體和一定量的酶標抗體競爭與固相抗原結合。標本中抗體量越多,結合在固相上的酶標抗體愈少,因此陽性反應呈色淺于陰性反應。如抗原為高純度的,可直接包被固相。如抗原中會有干擾物質,直接包被不易成功,可采用捕獲包被法,即先包被與固相抗原相應的抗體,然后加入抗原,形成固相抗原。洗滌除去抗原中的雜質,然后再加標本和酶標抗體進行競爭結合反應。競爭法測抗...
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細菌富集培養基和真菌富集培養基有什么區別?
2021-4-14
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為了獲得單一類型微生物,即純培養物,微生物學家通常采用稱作富集培養的技術。為了富集,首先要選擇好適合對象微生物的培養基,稱為選擇性培養基。例如,當我們想分離有固氮作用的細菌時,在培養基中可以加糖,但不能用含氮的營養物。又如培養厭氧菌時要隔絕氧氣,而好氧菌則要保證通氣。此外,某些特定微生物需要特殊的營養物,例如許多致病菌必須在培養基中加入血清,有些微生物又需要特定的維生素。還有細菌、放線菌的生長繁殖一般要求偏堿(7.0~7.5),霉菌和酵母菌要求偏酸(4.5~6);分離放線菌時...
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做到幾下幾點 可保證Elisa試劑盒的檢測結果正確
2021-2-25
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Elisa試劑盒具有敏感性高,特異性強,快速等特點,目前廣泛應用于農獸藥、真菌殘留檢測。但該方法從加樣、洗板、顯色到讀數步驟繁多,其中任何一步控制不好都可能影響檢測結果的準確性。因此,在實際測定操作中一定要注意以下幾點。一、溫度1.試劑盒回溫大多數ELISA檢測試劑盒為冷藏(2℃-8℃)保存。從冰箱拿出來后,先不要急于打開試劑盒,要等試劑盒的溫度平衡至室溫且試劑盒盒表面無冷凝水。檢測所用的試劑需充分混勻且*溶解后再用。提前1~2小時取出試劑盒,放在室溫中;或在預設25℃恒溫培...
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你的還原糖檢測做對了嗎?
2021-2-20
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能夠還原斐林(H.vonFehling)試劑(本尼迪特試劑)或托倫斯(B.Tollens)試劑的糖稱為還原糖,所有的單糖(除二羥丙酮),不論醛糖、酮糖都是還原糖。大部分雙糖也是還原糖,蔗糖例外。斐林試劑是含Cu2+絡合物的溶液,被還原后得到磚紅色Cu2O的沉淀。托倫斯試劑被還原后能生成單質銀,發生“銀鏡反應”。分子結構中含有還原性基團(如游離醛基或游離酮基)的糖,叫還原糖。如葡萄糖。果糖含有游離的酮基,所以果糖也屬于還原糖。還原性質一般情況下,單糖的還原能力主要來自它的醛基,...