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人elisa試劑盒的檢測(cè)基礎(chǔ)是什么,你知道嗎?

2022-02-24 [979]
  人elisa試劑盒ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。
 
  人elisa試劑盒適用于體外定量測(cè)定人血清,血漿,組織勻漿,細(xì)胞裂解液,細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其他生物液體中的CTGF。樣品溶血會(huì)影響結(jié)果,不能檢測(cè)到溶血標(biāo)本。進(jìn)行測(cè)定時(shí),應(yīng)將樣品置于室溫。
 
  人elisa試劑盒檢測(cè)原理:ELISA試劑盒,就是用ELISA的方法定量檢測(cè)CTGF的試劑盒。它的檢測(cè)原理:夾心酶免疫測(cè)定樣本中的CTGF的量,捕獲抗體已預(yù)孵育在板子上,然后將標(biāo)準(zhǔn)品或樣品與CTGF特異的生物素偶聯(lián)抗體制劑一起添加到合適的微量滴定板孔中;接下來(lái),將結(jié)合到辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的親和素加入到每個(gè)微板孔中孵育;加入TMB底物溶液后,只有那些包含CTGF、生物素結(jié)合抗體和酶結(jié)合抗生物素的孔才會(huì)顯示顏色變化;通過(guò)添加硫酸溶液終止酶-底物反應(yīng),并在450nm±10nm的波長(zhǎng)處用分光光度法測(cè)量顏色變化;將樣品的OD值與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較,確定CTGF在樣品中的濃度。
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